استفاده DNA از برگ خشک شده غلات با روشی سریع و بدون استفاده از ازت

پذیرفته شده برای پوستر
عنوان دوره: پانزدهمین کنگره زراعت و اصلاح نباتات ایران
نویسندگان
1داﻧﺸﺠﻮی ﻛﺎرﺷﻨﺎﺳﻲارﺷﺪ اﺻﻼح ﻧﺒﺎﺗﺎت داﻧﺸﻜﺪه ﻛﺸﺎورزی، داﻧﺸﮕﺎه ﻳﺎﺳﻮج
2داﻧﺸﻴﺎر اﺻﻼح ﻧﺒﺎﺗﺎت داﻧﺸﻜﺪه ﻛﺸﺎورزی، داﻧﺸﮕﺎه ﻳﺎﺳﻮج
چکیده
اﺳﺘﻔﺎده از ﺗﻜﻨﻴﻚﻫﺎی ﻣﺨﺘﻠﻒ ﻣﻮﻟﻜﻮﻟﻲ ﺟﻬﺖ اﺻﻼح ﮔﻴﺎﻫﺎن ﻧﻴﺎزﻣﻨﺪ اﺳﺘﺨﺮاجDNA ﺑﺎ ﻛﻴﻔﻴﺖ ﺑﺎﻻ اﺳﺖ. در اﻏﻠﺐ روشﻫﺎی ﺟﺪاﺳﺎزی DNAی ﮔﻴﺎﻫﻲ ﻻزم اﺳﺖ ﺟﻬﺖ ﭘﻮدر ﻛﺮدن ﻣﻮاد ﮔﻴﺎﻫﻲ از ﻧﻴﺘﺮوژن ﻣﺎﻳﻊ اﺳﺘﻔﺎده ﺷﻮد ﻛﻪ اﻳﻦ ﻣﺎده ﻫﻢ ﺳﻤﻴﺖ دارد و ﻫﻢ ﺗﻬﻴﻪ و ﻧﮕﻬﺪاری آن ﺳﺨﺖ ﺑﻮده و ﻧﻴﺎز ﺑﻪ ﺗﺠﻬﻴﺰات وﻳﮋه، اﻳﻤﻨﻲ و ﻫﺰﻳﻨﻪ دارد و از ﻃﺮف دﻳﮕﺮ ﺑﺎﻳﺪ ﻧﻤﻮﻧﻪ ﮔﻴﺎﻫﻲ ﺷﻤﺎ ﺑﺼﻮرت ﺗﺮ و ﺑﺪون ﭘﻼﺳﻴﺪﮔﻲ ﺑﻪ آزﻣﺎﻳﺸﮕﺎه ﻣﻨﺘﻘﻞ ﮔﺮدد. روش اراﺋﻪ ﺷﺪه در اﻳﻦ ﭘﮋوﻫﺶ ﻳﻚ روش ﺳﺮﻳﻊ، اﻳﻤﻦ، اﻗﺘﺼﺎدی و ﺳﺎده ﻣﻲﺑﺎﺷﺪ. اﻳﻦ دﺳﺘﻮراﻟﻌﻤﻞ ﺑﺮای ﺟﺪاﺳﺎزی DNA از ﺑﺮگ ﮔﻴﺎﻫﺎن ﮔﻮﻧﻪ ﻏﻼت ﺑﺴﻴﺎر ﻛﺎرﺑﺮدی ﻣﻲﺑﺎﺷﺪ. در اﻳﻦ ﺗﺤﻘﻴﻖ،اﺑﺘﺪا ﺑﺮگﻫﺎی ﮔﻨﺪم را در ﻣﺮﺣﻠﻪ 4 ﺑﺮﮔﻲ ﺑﺮداﺷﺘﻪ و در دﻣﺎی 30 درﺟﻪ ﺳﺎﻧﺘﻲﮔﺮاد ﺧﺸﻚ ﻣﻲﺷﻮﻧﺪ. ﭘﺲ از ﭘﻮدر ﻛﺮدن ﺑﺮگ ﻫﺎی ﺧﺸﻚ در ﻫﺎون ﭼﻴﻨﻲ، ﺑﺎﻓﺮ اﺳﺘﺨﺮاج را ﺑﻪ آن اﻓﺰوده و DNA ﮔﻴﺎه اﺳﺘﺨﺮاج ﺷﺪ. ﺳﭙﺲ آزﻣﻮنﻫﺎی ﻛﻴﻔﻴﺖ ﺳﻨﺠﻲ ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از اﻟﻜﺘﺮوﻓﻮرز و دﺳﺘﮕﺎه اﺳﭙﻜﺘﺮوﻓﺘﻮﻣﺘﺮی ﺑﺮ روی آن اﻧﺠﺎم ﺷﺪ. ﻧﺘﺎﻳﺞ ﺑﺪﺳﺖ آﻣﺪه ﺣﺎﻛﻲ از ﻛﺎراﻳﻲ ﺑﺎﻻی اﻳﻦ روش ﺑﻮد. در ﻣﺮاﺣﻞ ﺑﻌﺪ، واﻛﻨﺶ PCR ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از آﻏﺎزﮔﺮﻫﺎی ISSR ﻛﺎراﻳﻲ ﺑﺎﻻی اﻳﻦ دﺳﺘﻮراﻟﻌﻤﻞ را ﺗﺎﻳﻴﺪ ﻛﺮد.
کلیدواژه ها